ОТЧЁТ
Безопасность и эффективность ветеринарных жевательных таблеток «Тиксфли»
СОДЕРЖАНИЕ
1. Описание жевательных таблеток «Тиксфли»
2. Безопасность влияние CBPI, входящего в состав ветеринарного препарата «Тиксфли» для человека при попадании на кожу
3. Безопасность влияние CBPI, входящего в состав ветеринарного препарата «Тиксфли» для человека при пероральном потреблении
4. Изучение безопасности влияние CBPI, входящего в состав ветеринарного препарата «Тиксфли» на крысах
5. Изучение влияния препарата, включающего CBPI совместно с D,Lметионином на возникновения нежелательных побочных реакций
6. Влияния на состояние собак CBPI в максимально рекомендованной дозе и в 4 раза превышающей максимальную рекомендованную дозу
7. Эффективность влияния CBPI в составе «Тиксфли» при естественном заражении Linognathus setosus собак породы Бигль
8. Эффективность ветеринарного препарата «Тиксфли» при эктопаразитозах собак различных возрастов инвазированных спонтанно при постоянном контакте с заражёнными собаками
9. Влияние ветеринарного препарата «Тиксфли» разных дозировок на лечение генерализованного демодекоза у собак при однократном пероральном применении
10. Эффективность применения минимальной и максимальной рекомендуемой концентрации CBPI у собак при лабораторном заражении клещами
11. Клинические исследования крови у собак после разового перорального применения ветеринарного препарата «Тиксфли» для профилактики от эктопаразитов
11. Клинические исследования крови у собак после разового перорального применения ветеринарного препарата «Тиксфли» для профилактики от эктопаразитов
Клинические исследования ветеринарного препарата «Тиксфли» для профилактики собак от эндопаразитов при однократном пероральном применении проводили на разновозрастных разнополых собаках для имитации стандартного применения препарата. Основным критерием состояния собак служил клинический анализ крови, который брали до приёма ветеринарного препарата (0 день) и через 10 и 90 дней после применения «Тиксфли». Исследование проводили на разновозрастных суках и кобелях пород боксёров и метисов. Все собаки были вакцинированы, перед началом исследования и имели удовлетворительное состояние здоровья. Оценивая результаты анализов крови, сравнивали, соответствуют ли показатели крови данным, полученным при клиническом исследовании животных. При оценке результатов анализа учитывали целый ряд факторов: референсные значения, физиологические особенности собаки (возраст, пол, порода, стадия полового цикла), потенциальное воздействие терапевтических препаратов и иных факторов на показатели крови, особенности транспортировки образца крови дата/время взятия образца и проведения исследования.
Самые существенные различия в нормальных значениях показателей связаны с возрастом животных. Отклонения от средневидовой нормы (принятой в литературе) у молодых и старых животных могут составлять 25-100 % и более. Изменения нормальных значений биохимических показателей крови, ассоциированные с возрастом и полом, обусловлены различиями в активности обменных процессов, в гормональном фоне, функциональной зрелости организма.
Например, разные условия содержания и кормления животных, накладывают отпечаток на метаболические процессы в организме и даже определяют предрасположенность к некоторым заболеваниям на генетическом уровне. У самок ниже концентрация холестерина, а также активность большинства ферментов (АлАТ, КФК), но выше содержание фосфора и желчных кислот.
Количественное содержание показателей в сыворотке крови, как у боксёров, так и у метисов находились в пределах референтных интервалов. Хотя можно отметить некоторую тенденцию к увеличению содержания некоторых показателей, связанных с особенностями временного интервала забора крови.
Предложенные массы таблетки с отношением содержанием к ней CBPI и D,Lметионина (DLM) экспериментально подобраны на основе проведения многофакторного исследования, а также с учётом отзывов хозяев собак, самостоятельно дающих своим питомцам таблетки. Для удобства дачи, контролю поедаемости таблетки важны две составляющие: масса таблетки для разового приёма и отношение основного действующего вещества к массе таблетки.
Существуют следующие разновидности таблеток «Тиксфли»:
1. «Тиксфли» 112,5 мг (таблетки для собак очень мелких пород (2 - 4,5 кг)). Каждая таблетка массой 1,5 г содержит в качестве действующего вещества 112,5 мг CBPI.
2. «Тиксфли» 250 мг (таблетки для собак мелких пород (> 4,5-10 кг)). Каждая таблетка массой 2,5 г содержит в качестве действующего вещества 250 мг CBPI.
3. «Тиксфли» 500 мг (таблетки для собак средних пород (> 10-20 кг)). Каждая таблетка массой 2,5 г содержит в качестве действующего вещества 500 мг CBPI.
4. «Тиксфли» 1000 мг (таблетки для собак крупных пород (> 20-40 кг)). Каждая таблетка массой 4,0 г содержит в качестве действующего вещества 1000 мг CBPI.
5. «Тиксфли» 1400 мг (таблетки для собак очень крупных пород (>40-56 кг)). Каждая таблетка массой 4,0 г содержит в качестве действующего вещества 1400 мг CBPI.
«Тиксфли» является ветеринарным продуктом для эффективной борьбы и профилактики заражения собак клещами или блохами, включающий в своём составе карбамоил бензамид фенил изоксазолин (carbamoyl benzamide phenyl isoxazoline) (CBPI) в качестве активного фармацевтического ингредиента. С целью нивелирования побочных эффектов от первичного воздействия на организм животных действующего вещества CBPI, входящего в состав «Тиксфли», включен компонент, снижающий его токсическое воздействие – D,L-метионин (DLM). D,Lметионин (DLM) он участвует в синтезе глютатиона, который обладает антиоксидантными свойствами, защищает клетки от свободных радикалов, снижающий токсическое воздействие CBPI посредством повышения системы метаболизма ксенобиотиков. Способствует восстановлению печени. D,L-метионин (DLM) снижает уровень гистамина. Гистамин используется организмом для запуска иммунного ответа, тем самым снижая риск возникновения аллергических реакция при применении совместно с CBPI. D,L-метионин (DLM) участвует в регуляции окислительного статуса эпителия кишечника, способствует целостности слизистой оболочки кишечника и его правильному функционированию.
Такой подход к созданию таблеток и изменению концентрации действующего вещества по отношению к массе таблетки позволяет индивидуально подходить к каждой породе собак, как по возрастной массе, так и по физиологическим особенностям животных, уменьшить токсическое воздействие на организм, а также снизить количество веществ, препятствующих качественному определению CBPI.
В данном исследовании изучили безопасность для собак перорального применения CBPI, входящего в состав таблеток «Тиксфли».
2. Безопасность влияние CBPI, входящего в состав ветеринарного препарата «Тиксфли» для человека при попадании на кожу
Жевательные таблетки «Тиксфли» даются собакам как ветеринарными врачами, так и хозяевами (заводчиками) собак, не прошедшими специализированное обучение. При применении таблетки происходит контакт с кожей действующего вещества CBPI. Количество CBPI, которое может попасть на кожу человека рассчитывается по формуле:
𝐴 = 𝐶 × 𝑇𝐻 × 𝑆
Где,
A- количество CBPI, попавшего на кожу, мг
C - концентрация CBPI в продукте, мг/см³
TH - толщина слоя продукта на коже, см
S - площадь контакта продукта с кожей, см²
В расчёт брали максимальный слой поверхности таблетки, истираемый при длительном обращении с ней в руках пользователя, который равен 0,01 см (0,1 мм или 100 мкм) и среднюю живую массу взрослого человека равную 70 кг.
Количество CBPI на коже человека в расчете на одну таблетку может быть рассчитано следующим образом:
Максимальное контактное воздействие CBPI на человека со средней массой тела 70 кг в наихудшем варианте эквивалентно дозе 0,333 мг/кг массы тела. Маловероятно, что вся доза останется на коже пользователя, т.к. после применения ветеринарных продуктов рекомендуется помыть руки. Даже при несоблюдении гигиенических процедур, данные дозировки CBPI являются незначительными для оказания каких-либо пагубных эффектов на организм человека, при условии отсутствия индивидуальной непереносимости компонентов таблетки.
3. Безопасность влияние CBPI, входящего в состав ветеринарного препарата «Тиксфли» для человека при пероральном потреблении
Пероральный приём человеком таблеток «Тиксфли» возможен при невнимательном или специальном попадании препарата в ротовую полость, а так же при контакте рук, немытых после дачи таблетки собаки. При случайном или 7 умышленным поедании таблетки «Тиксфли», количество CBPI при расчёте средней живой массы взрослого человека 70 кг и ребёнка 18 кг составляет:
Приём таблетки ребёнком маловероятен (кроме случаев умышленной дачи ребёнку таблетки «Тиксфли»), т.к. каждая таблетка упакована в отдельный блистер, для вскрытия которого требуется сноровка и сила, что затрудняет доступ ребёнку к этому препарату. Отталкивающим фактором для ребёнка будет неспецифический запах и вкус таблетки, что так же снижает привлекательность её для детей. Случайный приём таблетки «Тиксфли» при соблюдении условий хранения и применения ветеринарных препаратов мало вероятен.
При несоблюдении правил гигиены или умышленных действиях максимальная дозировка CBPI попавшая в ЖКТ составляет 5-10 % от количества CBPI на руках, при этом, количество CBPI при расчёте средней живой массы взрослого человека 70 кг и ребёнка 18 кг составляет:
Данные дозировки CBPI являются незначительными для оказания каких-либо пагубных эффектов на организм человека или ребёнка, при условии отсутствия индивидуальной непереносимости компонентов таблетки, а так же соблюдения правил гигиены при работе с ветеринарными препаратами.
Исходя из выше представленных расчетов, ожидаемое максимальное разовое воздействие на организм пользователя составляет 0,333 мг/кг массы тела при кожном контакте и 20 мг/кг массы тела при пероральном приеме. Ожидаемая максимальная разовая доза воздействия на детей составляет 77,78 мг/кг массы тела при пероральном приёме таблетки, содержащей 1400 мг CBPI.
Принимая во внимание коэффициент неопределенности, равный 10, для внутривидовых (в пределах человеческого вида) различий в чувствительности, общий коэффициент неопределенности, равный 100, применяется для характеристики риска, связанного с пределами воздействия, на основе требуемого набора проведения адекватных, последовательных и качественных исследований токсичности. Этот стандартный фактор неопределенности дополнительно обосновывается отсутствием воздействия на эмбриональное развитие ниже уровней токсической дозы, отсутствием мутагенности и свидетельств канцерогенного потенциала. Пределы воздействия для взрослых и детей представлена ниже.
Для детей риск при однократном пероральном применении низок, особенно если принять во внимание, что дозировка CBPI, при которой не наблюдали нежелательные эффекты была самой высокой из протестированных доз на крысах.
4. Изучение безопасности влияние CBPI, входящего в состав ветеринарного препарата «Тиксфли», на крысах
Потенциальные токсикологические эффекты CBPI исследованы в лабораторных условиях с использованием лабораторных животных. Исследования проводили согласно ГОСТ 33216-2014 «Руководство по содержанию и уходу за лабораторными животными. Правила содержания и ухода за лабораторными грызунами и кроликами» и постановления 29-17 от 31.10.2007 «Об обращении с животными». Все лабораторные крысы содержались в типовых деревянных клетках на древесно-стружечной подстилке. Сверху клетки закрывались сетчатой металлической крышкой, на которой смонтирована ниппельная поилка на 200 мл. Перед исследованием все животные были подвергнуты профилактическому карантинированию. В течение карантина проводили ежедневный осмотр каждого животного (поведение и общее состояние), дважды в день у животных оценивали такие критерии, как состояние шерстяного покрова, поедаемость корма, потребление воды. При оценке изменений, наблюдаемых у животных в эксперименте, исключалась возможность влияния всех побочных факторов, не связанных с приемом препарата (заболевания животных, изменения рациона или содержания). В начале и конце эксперимента животных в опытных и контрольной группах взвешивали для контроля динамики массы тела. По завершении эксперимента минимум 5 крыс обоих полов с каждой группы умерщвляли с целью патологоанатомического вскрытия для исследования изменений в органах и тканях
Острая токсичность исследовали путём дачи однократно перорально CBPI в дозе 2000 мг/кг массы тела крысам. При этом не наблюдали негативных клинических изменений. Данные исследования подтверждают ранее опубликованные исследования Arcelin 2010a, 2010b.
В ходе исследования хронической токсичности на крысах не наблюдали летального исхода лабораторных животных, деструктивных клинических проявлений и изменения потребления корма и воды, живая масса животных во всех группах не изменилась. CBPI не оказывает выраженного отрицательного воздействия на организм лабораторных животных при длительном применении. Сохранность во всех группах 100 %, не наблюдали павших животных. Лабораторные крысы в период опыта были активными, потребляли корм и воду в соответствии с возрастными нормативными значениями, шерсть животных была гладкой, глазки блестящие, черные, не наблюдали ран, изъязвлений или расчесов на слизистых и кожных покровах.
Не выявлено изменений в пищеварительной и выделительной функциях. Патоморфологические исследования подтвердили отсутствие токсического воздействия на органы и системы организма опытных крыс, видимых изменений в макроскопическом строении обнаружено не было, органы у опытных и контрольной групп крыс соответствовали физиологической норме.
Данные результаты подтверждают ранее полученные данные от Kaiser, опубликованные в 2010-2012 годах. Динамика изменения живой массы у крыс представлена ниже. Изменения гематологических и биохимический показателей крови лабораторных крыс опытных и контрольной групп в ходе исследования хронической токсичности CBPI указаны ниже.
Мониторинг общего состояния животных экспериментальных групп не выявил отклонений от физиологических норм.
В результате оценки анализа крови установлено, что в крови лабораторных крыс все показатели в опытной и контрольной групп находились в референтных значениях нормы, не имели статистически достоверных изменений, что свидетельствует об отсутствии отрицательного воздействия CBPI на гематологические и биохимические показатели крови животных и на кроветворную систему в целом.
В исследованиях токсичности для пренатального развития на крысах (Whitlow, 2010, 2012) не наблюдалось воздействия на эмбрионально- развитие при дозах, превышающих уровни токсичности для матери.
Нет никаких доказательств канцерогенного потенциала CBPI на мутагенность (Sokolowski 2010, Wollny 2012, Bohnenberger 2012, Roth 2012) и отсутствии предраковых поражений в исследованиях токсичности, что указывает на отсутствие необходимости в дополнительных исследованиях.
CBPI не вызывает раздражения кожи или глаз, а также повышенной чувствительности кожи к CBPI и демонстрирует хорошую местную переносимость (Arcelin, 2010c, 2010d, 2010e).
В таблице приведены токсикокинетические параметры CBPI: Cmax (максимальная концентрация) и AUC (площадь под кривой зависимости концентрации от времени), определенные на основе концентраций CBPI в плазме крови крыс, полученных через 0,5, 2, 4, 8 и 24 часа после перорального или кожного применения на 28-й день в ходе 4-недельных исследований токсичности повторных доз по данным Kaiser (2011a, 2011b, 2012).
Согласно полученным данным, у крыс в период с 1-го по 28-й день применения CBPI коэффициент его накопления в плазме крови составлял около 5 при пероральном приеме и 11-21 при кожном применении. У самок крыс наблюдалась более высокая биодоступность CBPI, чем у самцов.
5. Изучение влияния препарата, включающего CBPI совместно с D,Lметионином на возникновения нежелательных побочных реакций
В опыте принимали участие беспородные собаки (Кобели и суки в равных количествах), с живой средней массой 11-13 кг и разных возрастов. Все собаки имели удовлетворительное состояние здоровья (нормальные видимые слизистые оболочки, не увеличенные лимфатические узлы, при аускультации сердца и легких посторонних шумов не фиксировали). Проблем с аппетитом не наблюдали. Собаки получали сухой корм в дозировках, рекомендуемым производителем этого корма. Доступ к воде был свободный. Все собаки были вакцинированы. Собак случайным образом распределили по 2-м группам по 50 собак (25 кобелей и 25 сук) с использованием процедуры блочной рандомизации и статистической выборки. Первая группа получила разово перорально таблетки, содержащие CBPI в количестве дозы CBPI 38-45 мг/кг живой массе собаки, без включения в состав таблетки D,L-метионина. Вторая группа получила разово перорально таблетки, содержащие CBPI в количестве дозы CBPI 38-45 мг/кг живой массе собаки, в состав которой входил D,L-метионин. За собаками наблюдали в течение 14 дней, регистрировали все побочные клинические симптомы. Фиксацию побочных явлений проводили ежедневно с учётом частоты и количества голов в каждой группе в течение всего периода наблюдения.
Результаты опыта показали, что присутствие D,L-метионина в таблетке «Тиксфли» значительно снизило видимые нежелательные клинические признаки, связанные с индивидуальной непереносимостью CBPI. Т.к. D,L-метионин участвует в синтезе глютатиона, который обладает антиоксидантными свойствами, а так же защищает клетки от свободных радикалов, снижающий острое воздействие CBPI посредством повышения системы метаболизма ксенобиотиков. Он так же способствует восстановлению печени. D,L-метионин снижает уровень гистамина. Гистамин используется организмом для запуска иммунного ответа, тем самым снижая риск возникновения аллергических реакция при применении совместно с CBPI. D,L-метионин ограничивает количество гистамина, вырабатываемого в организме собаки, что значительно облегчает возможные аллергические и негативные реакции. D,L-метионин участвует в регуляции окислительного статуса эпителия кишечника, способствует целостности слизистой оболочки кишечника и правильного его функционирования, что влияет на снижение диарей при приёме «Тиксфли». В результате исследования собаки, получавшие «Тиксфли» содержащий D,L-метионин, значительно легче переносили приём CBPI, на что указывает значительное снижение количество негативных эффектов, так рвота была снижена в 4-6 раз. В опытной группе не было зафиксировано каких-либо проявлений аллергических реакций, снижения аппетита и временной гипертермии.
6. Влияния на состояние собак CBPI в максимально рекомендованной дозе и в 4 раза превышающей максимальную рекомендованную дозу
В опыте принимали участие молодые собаки мелких пород в количестве 60 голов (30 кобелей и 30 сук), отобранные по возрасту и живой массе. Средняя масса собак 6,1-6,4 кг. Все собаки были обследованы ветеринарными врачами и имели удовлетворительное состояние здоровья. Собак содержали в помещении с температурным режимом 16-18 °C с продолжительностью светового дня 11 часов. Собак кормили стандартным сухим кормом в дозировках, рекомендуемым производителем кормов. Доступ к воде был свободный. Собак содержали в индивидуальных клетках с первого дня до конца исследования. Все собаки были вакцинированы. Собак случайным образом распределяли по группам с использованием процедуры блочной рандомизации и статистической выборки.
В ходе опыта оценивали влияние «Тиксфли», произведённый в рамках стандартов GMP, при пероральном введении, в дозах в 1 и 4 раза превышающей максимальную рекомендованную дозу, но не более 56 мг/кг и не более 224 мг CBPI /кг массы тела собаки соответственно. С учётом увеличения массы собак с возрастом дозировку CBPI регулировали. В каждой группе было по 20 голов собак (10 кобелей и 10 сук). Собакам давали таблетки, содержащие CBPI, трижды с интервалом 70 дней, а именно на 1-й, 70-й и 140-ой день опыта. Общее состояние здоровья собак наблюдали два раза в день в течение опыта.
Индивидуальное потребление корма собаками регистрировали ежедневно, массу тела еженедельно на протяжении всего исследования. Образцы крови отбирали для выявления клинической патологии на 133 и 203 дни опыта.
Контрольной группе не давали никаких инсектицидных и акарицидных препаратов. Первой опытной группе давали «Тиксфли» в форме таблеток, в количестве равной максимальной рекомендуемой дозе CBPI, но не более 56 мг/кг. Второй опытной группе давали «Тиксфли» в форме таблеток из расчёта дозировки CBPI не превышающую более 224 мг/кг.
На протяжении всего исследования не наблюдалось никаких различий по живой массе, темпах роста и потреблении корма между опытными группами и контрольной группой. Не было обнаружено никаких патологий, связанных с совместным использованием CBPI и D,L-метионина ни по одному из оцениваемых параметров. Основные показатели крови не выходили за нормативные пределы показателей.
Пероральное введение таблеток «Тиксфли» включающего в своём составе CBPI и D,L-метионин здоровым собакам в дозах до 224 мг/кг три раза с 10-недельными интервалами не привело к каким-либо ухудшениям их здоровья. Пероральное введение CBPI в максимальной рекомендованной лечебной дозе (56 мг/кг) хорошо переносится собаками и имеет запас безопасности по концентрации действующего вещества более чем в четыре раза. В состав «Тиксфли» включён D,L-метионин, снижающий острое воздействие CBPI посредством повышения системы метаболизма ксенобиотиков, т.к. участвует в синтезе глютатиона, который обладает антиоксидантными свойствами, и защищает клетки от свободных радикалов. D,Lметионин снижает уровень гистамина, тем самым снижая риск возникновения аллергических и побочных реакций при применении совместно с CBPI
7. Эффективность влияния CBPI в составе «Тиксфли» при естественном заражении Linognathus setosus собак породы Бигль
Изучение влияния совместного применения D,L-метионин и CBPI в составе «Тиксфли» при естественном заражении Linognathus setosus проводили на собаках породы Бигль. Живая масса собак 10,1-15,2 кг. Собакам давали разово одну таблетку «Тиксфли», содержащую 500 мг CBPI, что соответствовало дозе CBPI 33-50 мг/кг. Количество живых L. setosus у всех собак подсчитывали перед дачей «Тиксфли», а также через 1, 7, 21 и 84 дня. У собак не наблюдалось проявление длительных нежелательных клинических признаков, связанных с дачей «Тиксфли». Процент эффективности против вшей L. setosus рассчитывали с использованием средних геометрических значений по формуле Эбботта. Количество вшей после обработки попарно сравнивали с количеством вшей до обработки.
Дача перорально однократно «Тиксфли», полностью устранило естественную инвазию L. setosus у собак через 21 дней после лечения. При обследовании собак через 3 месяца вши так же не появились. Результаты этого исследования демонстрируют инсектицидную эффективность «Тиксфли» против естественного заражения собак L. setosus, благодаря системной активности «Тиксфли» в течение 3- х месяцев, который превышает период развития L. setosus от яйца к яйцу и препятствует повторному заражению вшами.
8. Эффективность ветеринарного препарата «Тиксфли» при эктопаразитозах собак различных возрастов инвазированных спонтанно при постоянном контакте с заражёнными собаками
Клинические исследования эффективности ветеринарного препарата «Тиксфли» при эктопаразитозах собак различных возрастов инвазированных спонтанно при постоянном контакте с заражёнными собаками проводили в условиях приюта для безнадзорных животных. В опыте использовали собак различных пород и беспородных в возрасте от 1 года до 12 лет. Все собаки были вакцинированы, перед началом исследования собаки имели удовлетворительное состояние здоровья (нормальные видимые слизистые оболочки, не увеличенные лимфатические узлы, при аускультации сердца и легких посторонних шумов не фиксировали). Собаки получали сухой корм в дозировках, рекомендуемым производителем этого корма. Доступ к воде был свободный. Собак, получавших «Тиксфли», содержали в вольерах, имевших контакт друг с другом для имитации контакта с собаками заражёнными эктопаразитами. Животным опытной группы задавали препарат «Тиксфли» из расчёта их массы тела. Было сформировано 3 опытные группы, разделённые по возрасту и массе. Эффективность ветеринарного препарата «Тиксфли» путём клинического осмотра кожи и волосяного покрова животных на наличие эктопаразитов в течение 3 месяцев, каждые 10 дней.
Полученные результаты показали высокую эффективность ветеринарного препарата «Тиксфли» против эктопаразитов даже в условиях присутствия рядом собак, инвазированных спонтанно эктопаразитами и имевших контакт с ними. Экстенсэффективность ветеринарного препарата «Тиксфли» «при эктопаразитозах собак составила 100 %. Выраженных клинических осложнений при применении ветеринарного препарата «Тиксфли» не наблюдали.
9. Влияние ветеринарного препарата «Тиксфли» разных дозировок на лечение генерализованного демодекоза у собак при однократном пероральном применении
Целью данного исследования было определение эффективности таблеток «Тиксфли» различной концентрации, применяемых однократно при генерализованном демодекозе собак. Демодекоз собак - паразитарное заболевание кожи, вызываемое клещами Demodex spp., которые развиваются в волосяных фолликулах. Локализованный демодекоз является легкой формой болезни и в большинстве случаев самостоятельно излечивается в течение 6-8 недель. Демодекоз считают генерализованным при поражении пяти или более участков тела у животного и требует оперативного лечения.
Собак с симптомами инфестации клещами Demodex spp. (более пяти очагов повреждений, пододерматит двух или более конечностей либо поражение всей поверхности тела). Кроме клинических признаков и симптомов поражения клещами Demodex spp., собаки были клинически здоровы и вакцинированы. За 3 месяца до начала опытов собаки не получали лечения кортикостероидами и препаратами 19 против эктопаразитов. Исследование проводилось методом слепой выборки. Собаки, участвовавших в исследовании, были распределены по полам и индивидуальному количеству клещей, обнаруженных у них до лечения, от большего количества к меньшему, и затем сгруппированы в группы. В опытных группах было равное количество самцов и сук, при этом «Тиксфли» задавали с учётом рекомендаций по дозировкам с учётом средней массы животного: «Тиксфли» 112,5 мг – 12 голов (средняя масса в группе 4,2 кг), «Тиксфли» 250 мг – 8 голов (средняя масса в группе 8,1 кг) , «Тиксфли» 500 мг – 14 голов (средняя масса в группе 17,3 кг), «Тиксфли» 1000 мг – 10 голов (средняя масса в группе 28,2 кг), «Тиксфли» 1400 мг – 12 голов (средняя масса в группе 44,1 кг).
В течение всего исследования животные содержались в индивидуальных вольерах. Контакты между животными были исключены. В вольерах для собак имелось закрытое помещение (лежак) и внешний выгул. Животные содержались при естественной температуре окружающей среды и естественном солнечном освещении. Животных кормили два раза в день в соответствии с рекомендациями производителя корма. Вода в свободном доступе.
Подсчет клещей осуществляли методом глубоких соскобов кожи (кожа соскабливалась лезвием скальпеля до появления мелких капелек крови) и отбирались с пяти участков тела. Участки тела, с которых брались глубокие соскобы, отмечались, и на каждом последующем осмотре соскобы отбирались с этих же мест или с участков новых повреждений. Глубокие соскобы: кожа соскабливалась лезвием скальпеля до появления мелких капелек крови.
Из соскобов готовили маркированные слайды с минеральным маслом и рассматривали под стереомикроскопом для выявления живых или мёртвых особей Demodex spp. Количество клещей других видов (Sarcoptes spр.) также подсчитывалось. Клинические проявления и распространённость демодекозных повреждений кожи оценивались у каждой собаки в дни отбора соскобов.
Результаты исследования развития повреждения на кожи после дачи препарата «Тиксфли» в различных дозировках. В таблице указано количество собак с повреждениями в группе в % и количество поражённых голов/количество голов в группе.
Распространенность участков эритемы у собак, однократно получивших «Тиксфли» перорально, снижалась с 50-62,5 % на 7 день дачи препарата, до 0 % через 84 день после начала лечения. Распространенность корочек, фолликулярных слепков и чешуек снизилась с 100 % у собак на 7 день после начала лечения до 0-10 % через 84 день после последней дачи «Тиксфли».
Восстановление шерстного покрова у собак в виде соотношения к поверхности тела, покрытой шерстью до начала лечения и после наблюдались у всех собак во всех группах. Однократное пероральное применение таблеток «Тиксфли» у собак разных возрастных групп, разделённых по живой массе при естественно возникшим генерализованным демодекозом привело к значительному снижению количества клещей уже на 28 день после перорального применения таблетки. Снижение числа клещей согласовывалось с уменьшением распространенности и выраженности повреждений кожи.
10. Эффективность применения минимальной и максимальной рекомендуемой концентрации CBPI у собак при лабораторном заражении клещами
В исследовании принимали участие 40 собак. Рандомизировано 20 собак с живой средней массой 20,5±0,2 кг разделили на две группы (опытную и контрольную) по 10 голов в каждой группе. Другие 20 собак с живой средней массой 39,8±0,3 кг так же разделили на две группы (опытную и контрольную) по 10 голов в каждой. Все участвовавшие в исследовании собаки были клинически здоровы, осмотрены ветеринаром, содержались в отдельных изолированных вольерах со свободным доступом к еде, кормили собак 2 раза в день сухими кормами в дозах рекомендуемых производителем кормов. Продолжительность акклиматизации – 10 дней.
Опытным группы собак давали однократно перорально таблетку «Тиксфли» 1000 мг (таблетки для собак крупных пород (> 20-40 кг)). Каждая таблетка массой 4,0 г содержит в качестве действующего вещества 1000 мг CBPI. Собаки массой 20 кг получила дозу CBPI равную 50 мг/кг живой массы, тогда как собаки массой 40 кг - 25 мг/кг CBPI соответственно.
За два дня до дачи препарата собак заражали клещами. Заражение клещами собак повторяли через 3, 6, 9 и 12 недель после начала опыта. Эффективность препарата и подсчёт клещей осуществляли каждые 3-4 дня. Каждую собаку заражали 20 взрослыми клещами, искусственно размещая в пяти разных местах на теле каждой собаки. Средняя эффективность (в %) действия у собак, которые получали перорально разово различные дозы CBPI, входящего в состав ветеринарного препарата «Тиксфли» в сравнении с контрольными группами, не получавшие «Тиксфли» представлена ниже.
После однократной дачи перорально таблетки «Тиксфли» 1000 мг (таблетки для собак крупных пород (> 20-40 кг)) у собак вех групп не наблюдались каких-либо нежелательные клинические проявления в течение всего опыта. Показатели крови, взятой на 20, 60 и 90 день опыта не выявили отклонения от нормативных показателей. Средняя степень заражения у собак контрольных групп составила 97- 98 %. Применение ветеринарного препарата «Тиксфли», содержащее в качестве действующего вещества CBPI было эффективным (эффективность >90 %) при дозировке 50 мг/кг живой массы собаки в течение 14 недель, а при дозировке 25 мг/кг – 13 недель.
1. Описание жевательных таблеток «Тиксфли»
«Тиксфли» - жевательная таблетка от светло-коричневого до темнокоричневого цвета плоской формы с гладкой или слегка шероховатой поверхностью. Является эффективным и безопасным инсектоакарицидным препаратом против иксодовых клещей (Ixodes spp., Dermacentor spp., Rhipicephalus sanguineus), демодекозных клещей (Demodex canis), саркоптоидных клещей (Sarcoptes scabiei, Otodectes cynotis) и блох (Ctenocephalides spp.), паразитирующих на собаках. Действующее вещество таблеток «Тиксфли» представлено карбамоил бензамид фенил изоксазолином (carbamoyl benzamide phenyl isoxazoline (CBPI)).
CBPI высокоэффективное инсектицидное и акарицидное действующее вещество, обеспечивающее длительную защиту от эндопаразитов при однократном пероральном применении. Рекомендуемый диапазон доз CBPI составляет от 25 до 56 мг/кг. После однократного перорального введения препарата, CBPI быстро адсорбируется, поступая в системный кровоток, связывается с белками плазмы крови, и уже через 24 часа отмечается его максимальная концентрация в плазме крови. Он эффективно распределяется в тканях, при этом наиболее высокая концентрация препарата достигается в жировой ткани, затем в печени, почках и мышцах. Длительное действие, медленная элиминация из плазмы крови (период полувыведения до 15 дней) и замедленное высвобождение обеспечивают эффективные концентрации CBPI в тканях в течение продолжительного периода. Максимальная концентрация в плазме крови и период полувыведения у разных животных может отличаться. CBPI не подвергается значимому метаболизму и выводится, главным образом, с фекалиями и частично с мочой. Статистически установленная разовая доза CBPI, которая при пероральном введении приведет к смерти у 50 % крыс (LD50) более 2 г/кг, а кожная (дермальная) LD50 у крыс более 2 г/кг.
В составе «Тиксфли» помимо действующего вещества входят наполнители: порошок из куриной печени, гидрофосфат кальция, магния стеарат, льняное и подсолнечное масло, повидон К30, D,L-метионин, сухое молоко, сахароза. Уникальный упрощённый состав наполнителей в «Тиксфли», предающие стабильность сохранности CBPI в течение гарантийного срока годности и оптимальное соотношения этого действующего вещества к массе таблетки, для удобства дачи её собакам разной живой массы. При чём, содержания CBPI в таблетке адаптировано для удобства дачи ветеринарного фармацевтического продукта 4 животным и составляет 7,5-35 % при массе таблеток от 1,5-4 грамма для животных массой в диапазоне от 2 до 56 кг. Этот фактор является лимитирующий для хозяев собак, которые дают таблетку самостоятельно. Во время разжёвывания большой таблетки, собаки часто оставляют часть таблетки не съеденной (выпадение частично разжёванной массы изо рта и т.д.), тем самым снижается доза поступившего действующего вещества в организм собаки. Удобство введения маленькой таблетки большим собакам позволяет гарантированно контролировать проглатывание таблетки, а также упрощает хозяевам дачу препарата